عملية القياس باستخدام تقنية SoltBlot

تعتبر هذه التقنية من اكثر الطرق استخداما في المختبرات الجنائية حاليا لقياس كمية الحمض النووي الوراثي المستخلص .


هذه التقنية خاصة بالحمض النووي الوراثي البشري وبعض انواع قرود الشامبانزي بسبب استخدام بروب (Prob) الذي يعتبر مكملا لتسلسل وحدة (alpha satellite) في الموقع الوراثي D17Z1 الموجود على كروموسوم رقم 17 لهذه الكائنات .



بدأت هذه التقنية باستخدام مواد مشعة وتم تطويرها باستخدام كواشف النصوع الكيميائي Chemaluminescent واخرى لونية Colorimetric .



في هذه التقنية يتم لصق الحامض النووي الوراثي المستخلص على غشاء من النايلون ثم يتم اضافة (تهجين) كاشف بروب (Prob) خاص بتهجين الحمض النووي الوراثي الآدمي على العينة الموجودة على الغشاء .

كلتا الطريقتين الكيميائية واللونية تنتج خطوط (بقع) ذات كثافة (لونية او اشعاعية) معينة ، نقوم بمقارنة هذه الخطوط بين العينة والعينات القياسية معروفة التركيز لمعرفة أي من هذه العينات القياسية يتشابه مع العينة ومن ثم يتم تقدير تركيز هذه العينة .


القياس باستخدام تقنية SoltBlot هو قياس نسبي تتم فيه مقارنة عينة مجهولة التركيز بعينات قياسية محضرة بطريقة التخفيف التسلسلي لعينة ذات تركيز معلوم ، بالامكان تحديد تركيز ثلاثين عينة باستخدام هذه التقنية (في وجود ثمان عينات قياسية) .


تستغرق هذه العملية عدة ساعات ونستطيع من خلالها معرفة تركيز العينات المستخلصة عن Chelex التي تنتج شريط واحد لانها ذات حساسية عالية تصل الى معرفة تركيز قدره 150 بيكوجرام أي مايعادل 50 نسخة من الحمض النووي الوراثي الآدمي.


هذه التقنية تسوق تجاريا على هيئة منتجين QuantBlot من شركة PE Biosystem والثاني ACES+2.0 من شركة Life Technologies ، وكلتا الشركتين امريكية وتستخدم نفس الكاشف (Probe D17Z1) الموجود على كروموسوم رقم 17 .

تحياتي
ستالين

[biology]

شكرا لك معلومه جيده