الرئيسية التحكم التسجيل
 

 
 
العودة   منتديات الكيمياء الحيوية للجميع > الكيمياء الحيوية الجنائية > استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية
 
 

إضافة رد
 
 
 
أدوات الموضوع انواع عرض الموضوع
 
 
 
 
قديم 04-08-2008, 07:10 PM   #1
الاميرال ستالين
ضيف

 






Messenger طريقة الفينول كلوروفورم (الاستخلاص العضوي)


الاستخلاص العضوي يتضمن اضافة متتابعة للعديد من المواد الكيميائية ، فيضاف اولا محلول يحتوي على مادة (SDS) Sodium Dodecyl Sulfate ومادة Proteinase K لتحطيم جدار الخلية وتحطيم البروتينات مثل البروتين (Histone) الذي يلتف حوله الحمض النووي الوراثي خلال تشكله داخل الكروموسوم ، ثم يضاف مخلوط الفينول كلوروفوم لفصل الحامض النووي الوراثي عن البروتينات لانه يذوب في الماء بصورة اكبر من ذوبانه في الفينول كلوروفورم .

بعدها تتم عملية ترشيح من خلال Centricon وتستخدم عملية التركيز هذه بدلا من الترسيب بالايثانول وذلك للتخلص من المواد المثبطة مثل مادة الهيموجلوبين الموجودة في كريات الدم الحمراء .

وعلى الرغم من ان هذه الطريقة تنتج كمية من الحامض النووي الوراثي ذات وزن جزيئي عالي الا انها تستغرق وقتا طويلا اضافة الى خطورة المواد المستخدمة و السمية العالية وعرضة العينات للتلوث اثناء نقل العينة من انبوب لآخر .



تحياتي
ستالين



من مواضيع الاميرال ستالين في المنتدى

   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 08-02-2010, 08:16 PM   #2
مسلم المصرى
بيوكيميائي ماسي
 
الصورة الرمزية مسلم المصرى

 









مسلم المصرى غير متواجد حالياً
Asl

[frame="2 98"]
جزاكم الله خيراً أخى الاميرال ستالين على هذه المعلومات الهامه وجعلها الله فى ميزان حسناتك

[/frame]



من مواضيع مسلم المصرى في المنتدى

   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 07-11-2011, 01:29 AM   #3
Glutathione
بيوكيميائي جديد

 









Glutathione غير متواجد حالياً
افتراضي

شكرا جزيلا على المعلومات
و لكن عند معالجة العينه بالفينول و الكلوروفورم
فتتم كالتالي :
يستعمل عادة خليط يسمى Phenol-chloroform-isomylalcohol و هذا السائل عباره عن طبقتين : طبقه علويه و هي الكلوروفوم و الايزومايل و طبقه سفليه و هي الفينول

يتم استعمال الفينول اولا مع العينه و يتم خلط العينه تماما في الفينول ثم نقوم بعملية الطرد المركزي للعينه .. يتم نقل الطبقه المائيه من العينه الى انبوب جديد ثم يضاف الكلوروفورم و يخلط جيدا مع العينه و بعد ذلك يطرد مركزيا و يتم نقل الطبقه المائيه الى انبوب جديد ثم يتم ترسيب ال DNA اما بال isopropanol أو با sodium acetate




   
رد مع اقتباس
 
 
إضافة رد


الذين يشاهدون محتوى الموضوع الآن : 1 ( الأعضاء 0 والزوار 1)
 
أدوات الموضوع
انواع عرض الموضوع

تعليمات المشاركة
لا تستطيع إضافة مواضيع جديدة
لا تستطيع الرد على المواضيع
لا تستطيع إرفاق ملفات
لا تستطيع تعديل مشاركاتك

BB code is متاحة
كود [IMG] متاحة
كود HTML معطلة

الانتقال السريع

المواضيع المتشابهه
الموضوع كاتب الموضوع المنتدى مشاركات آخر مشاركة
طريقة اجراء تحليل البراز بالتفصيل فارس البادية تقنيات المعمل - Lab's techniques 13 10-11-2009 08:47 PM
الاستخلاص التفاضلي الاميرال ستالين استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية 0 04-08-2008 07:18 PM
طريقة الاستخلاص بواسطة بطاقات Fta الاميرال ستالين استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية 0 04-08-2008 07:16 PM
طريقة الاستخلاص بمادة Chelex الاميرال ستالين استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية 0 04-08-2008 07:13 PM



الساعة الآن 12:15 PM


Powered by vBulletin® Version 3.8.7
Copyright ©2000 - 2014, vBulletin Solutions, Inc.
يوتك