الرئيسية التحكم التسجيل
 

 
 
العودة   منتديات الكيمياء الحيوية للجميع > الكيمياء الحيوية الجنائية > استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية
 
 

إضافة رد
 
 
 
أدوات الموضوع انواع عرض الموضوع
 
 
 
 
قديم 04-08-2008, 07:03 PM   #1
الاميرال ستالين
ضيف

 






Messenger استخلاص الحمض النووي الوراثي


الحامض النووي الوراثي يجب ان يفصل عن باقي المواد الخلوية (البروتين) قبل فحصه ، فالبروتينات الخلوية التي تحفظ وتحمي الحمض النووي الوراثي داخل البيئة الخلوية تقف عائقا لايمكننا من فحص الحمض النووي الوراثي الامر الذي طورت من اجله طرق الاستخلاص لفصل البروتينات والمواد الخلوية عن الحمض النووي الوراثي .


تستخدم المختبرات الجنائية ثلاث طرق لاستخلاص الحمض النوي الوراثي هي :
• الاستخلاص العضوي .
• الاستخلاص بمادة Chelex .
• الاستخلاص بواسطة بطاقات FTA .



ويعتمد عزل واستخلاص الحمض النووي الوراثي على نوع الاثر الحيوي المفحوص فمثلا يعامل الدم الطازج بطريقة مختلفة عن بقع الدم الجافة او عينات العظام .

الاستخلاص العضوي يطلق عليه الاستخلاص باستخدام مادة الفينول كلورفورم وقد ظل هذا مستخدما ويتوقع ان يستمر مع تقنية PCR وتقنية RFLP .

ويعتبر الاستخلاص بمادة Chelexاسرع من الاستخلاص العضوي اضافة الى احتوائه على عدد اقل من الخطوات وبالتالي تضاءل فرصة تلوث عينة بأخرى اثناء نقلها من انبوب لآخر فالعملية بكاملها تتم في انبوب واحد ،على الرغم من ان هذه العملية تنتج شريطين منفصلين من الحمض النووي الوراثي ، الامر الذي لا يلائم تقنية PCR ، غير انها تلائم التقنيات المبنية على تفاعل PCR .

عند التعامل مع العينات يجب اخذ الحيطة والحذر لتفادي تلوث العينات جراء انتقال عينة من انبوب لآخر اثناء عملية الاستخلاص وتعتبر مرحلة الاستخلاص من اكثر المراحل عرضة للتلوث لذلك يجب فصل وقت ومكان استخلاص العينات الجنائية عن تلك القياسية .


من الطرق الشائعة لتحضير عينة دم قياسية هو اخذ نقطة دم على قماش قطني ( استخدمت حديثا بطاقات FTA) لتغطي مساحة سنتيمتر مربع ( كل قطرة دم تعادل 10 ميكروليتر ) تحتوي تقريبا 70,000 – 80,000 كرية دم بيضاء وتنتج تقريبا 500 نانوجرام من الحمض النووي الوراثي ويختلف هذا الناتج من عينة لاخرى بناء على عدد كريات الدم البيضاء وفاعلية الطريقة المستخدمة في الاستخلاص .

يخزن الحمض النووي الوراثي المستخلص في درجة حرارة _ 20 مئوية او _ 80 درجة مئوية لتخزينه لفترات طويلة جدا وذلك لتفادي تأثير الانزيمات المحللة (Nuclease) وهي انزيمات موجودة في الخلية تفكك جزيء الحامض النووي الوراثي مما يسمح بتدوير عملية تركيب النيوكليتدات .

وهذه الانزيمات تحتاج لعنصر المغنيسيوم لتعمل بشكل مثالي ولذلك تستخدم في جمع عينات الدم القياسية انابيب تحتوي على مادة EDTA التي ترتبط بعنصر المغنيسيوم وتجعل الانزيمات غير فعالة .



تحياتي
ستالين



من مواضيع الاميرال ستالين في المنتدى

   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 11-07-2008, 12:03 AM   #2
أصداف المحبه
بيوكيميائي جديد

 









أصداف المحبه غير متواجد حالياً
افتراضي

[rainbow]مشكوووووور ع المعلوماااااااات[/rainbow]




   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 07-11-2011, 01:24 AM   #3
Glutathione
بيوكيميائي جديد

 









Glutathione غير متواجد حالياً
افتراضي

موضوع ممتاز جداً
و بالنسبه لطرق التخزين .. عند معالجة العينه بمادة الفينول يتم القضاء تماما على أي انزيمات في العينه بما فيه ذلك DNase و RNase المعروف باستقراره العالي جدا

و شكرا




   
رد مع اقتباس
 
 
إضافة رد


الذين يشاهدون محتوى الموضوع الآن : 1 ( الأعضاء 0 والزوار 1)
 
أدوات الموضوع
انواع عرض الموضوع

تعليمات المشاركة
لا تستطيع إضافة مواضيع جديدة
لا تستطيع الرد على المواضيع
لا تستطيع إرفاق ملفات
لا تستطيع تعديل مشاركاتك

BB code is متاحة
كود [IMG] متاحة
كود HTML معطلة

الانتقال السريع

المواضيع المتشابهه
الموضوع كاتب الموضوع المنتدى مشاركات آخر مشاركة
كل ما تود معرفته عن pcr بسمةعلي التطبيقات الجنائية للحمض النووي الوراثي 2 01-24-2012 11:38 PM
عملية قياس الحمض النووي الوراثي الاميرال ستالين استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية 1 07-11-2011 01:36 AM
فكرة الأحماض النووية مسلم المصرى الاحمــاض النـووية - Nucleic Acids 0 11-08-2009 02:58 PM
اجوا المساعدة .. يحث عن تقنية pcr في فصل dna ؟؟ المجدوبي قسم الاسئله و الاستفسارات - Questions 4 07-16-2008 09:40 PM
خصائص شريطي الحمض النووي الوراثي الاميرال ستالين الكيمياء الحيوية الجنائية العامة 0 04-15-2008 08:21 PM



الساعة الآن 07:36 AM


Powered by vBulletin® Version 3.8.7
Copyright ©2000 - 2014, vBulletin Solutions, Inc.
يوتك