الرئيسية التحكم التسجيل
 

 
 
العودة   منتديات الكيمياء الحيوية للجميع > الكيمياء الحيوية > تقنيات المعمل - Lab's techniques
 
 

تقنيات المعمل - Lab's techniques الخطوات المعملية و التقنيات و الاجهزه

إضافة رد
 
 
 
أدوات الموضوع انواع عرض الموضوع
 
 
 
 
قديم 12-05-2008, 06:24 PM   #1
لـولـو
بيوكيميائي جديد

 









لـولـو غير متواجد حالياً
افتراضي ماهي طريقة وفكرة عمل spectrophotometer



هل من الممكن احد يشرح شرح مبسط لطريقة وفكرة عمل هذا الجهاز


بالعربي طبعا ^_^ لاني لقيت بالانجلش وما استوعبته كويس


وشكرا لكم



من مواضيع لـولـو في المنتدى

   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 12-05-2008, 11:00 PM   #2
سونهام يغمور
Bioc سابقاً
 
الصورة الرمزية سونهام يغمور

 









سونهام يغمور غير متواجد حالياً
افتراضي

باختصار الجهاز فيه لمبه

تسلط الضوء على انبوبه العينه اللى تنفذه على السائل او الماده المراد قياس تركيزها

طبعا كل ماده لها لون معين

و كل لون له طول موجي معين

يعني مثلا الاحمر 450 اعتقد
الازرق 600 و حاجه

المهم لما يقع الضوء الابيض على المحلول يمتص جميع الاطوال الموجيه ما عدا الخاصه بلونه و يرجع يعكسها من الناحيه الاخرى اللي بيكون فيها مستقبل لهذا الضوء

و بعمليه حسابيه خاصه يقوم بها الجهاز يعطي الطول الموجي للضوء المنعكس

ثم بعمليه حسابيه او بالرسم البياني مع التركيز يعطيكي تركيز الماده الموجوده في الانبوب



من مواضيع سونهام يغمور في المنتدى

التوقيع

..ادعموني هنا..
فيسبوك(FaceBook) -
مدونتي(soon)

::مواقعي الشخصية::


و اخيرا اتنشر بحث الماجستير
   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 02-15-2009, 10:06 AM   #3
nasser
بيوكيميائي جديد

 









nasser غير متواجد حالياً
افتراضي

التحليل الطيفي

تعتمد فكرة التحليل على تسليط حزمة مركزة من شعاع ظوئي على العينة المراد تحليلها , ثم قياس شدة الشعاع الظوئي الممتص في العينة وبالتالي تقدير تركيز مادة الاختبار. نبسط اكثر.
ّ
حينما تتعرض الذرات والجزيئات لمصدر طاقة , حراراي, ظوئي ..... الخ تمتص الالكترونات في الذرات والروابط بين الجزئات هذة الطاقة وتصبح في حالة مثارة وبالتالي تنتقل الى مستويات طاقة اعلى ثم تعود الالكترونات الى مستويات الطاقة الاطثر استقرارا وتشع الطاقة الممتصة في صورة جرارة او ظوء او تفلور.
ينجم عن امتصاص الطاقة , زيادة في الحركة الدورانية او الانتقالية للجزئات.

وحيث ان الظوء المرئي صورة من صور الطاقة( اشعاع كهرومغناطيسي) فعندما تكون طاقة الروابط الكيمائية للجزئات وللالكترونات في الذرات مساوية لطاقة الاشعاع الظوئي, يعمل على اثارة الالكترونات وانتقالها الى مستويات طاقة اعلى وبالتالي امتصاص الظوء

تبنى على هذة الظاهرة العديد من التطبيقات لقياس تراكيز المواد وتحديد هويتها.

في المطياف الظوئي:
هناك مادة يراد تحديد تركيزها ويتم كالاتي:
المادة المراد تحديدها تكون ملونة او تتفاعل مع مركب لتنتج مركب ملون
تسلط حزمة ظوئية لها طول موجي محدد ( اي الطول الموجي للظوء الذي يحدث عندة اكبر امتصاص للطاقة) حتي تكون حساسية الاختبار دقيقة وبالتالي تقدير التراكيز المنخفظة للمادة,

اساس الفكرة قانون lambert
يحدد العلاقة بين شدة الشعاع الممتص وتركيز المادة , وهناك علاقتين
النفاذية و
الامتصاصية

النفاذية تعني قدرة الشعاع الظوئي على النفاذ خلال العينة , وفية تقاس نسبة الشعاع الساقط على العينة على الشعاع النافذ وهي عبارة عن علاقة لوغارتيمية

الامتصاصية : تحول العلاقة اللوغارتيمية الى علاقة خطية ويتم فيها قياس علاقة شدة الشعاع الممتص بالنسبة لتركيز المادة

طبعا لابد من اجراء معايرة للجهاز , والمحاليل , وقياس العلاقة الخطية لمحاليل قياسية من العينة قبل اجراء القياسات

هذا وشكرا




   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 04-17-2010, 08:14 AM   #5
أمة الله 92
بيوكيميائي جديد

 









أمة الله 92 غير متواجد حالياً
افتراضي

جزاكى الله خيرا يالولو على السؤال
لانى استفدت من اجابت اخواتك فجزاهم الله خير الجزاء
وانى بعمل بحث على هذا الجهاز باللغة الانجليزية بس لم اجد شرح بسيط موفى
فبالله عليكم من يعرف لايبخل على
جزاكم الله خيرا




   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 04-30-2010, 10:34 PM   #6
فلوروسنتا
بيوكيميائي جديد

 









فلوروسنتا غير متواجد حالياً
افتراضي

انا من زمان ادور على طريقة تشغيل الجهاز اللي عندي




   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 05-29-2010, 08:46 PM   #7
ابا عبدالله
بيوكيميائي برونزي
 
الصورة الرمزية ابا عبدالله

 









ابا عبدالله غير متواجد حالياً
افتراضي Principles of Spectrophotometry

[align=left]
Principles of Spectrophotometry


A spectrophotometer consists of two instruments, namely a
spectrometer for producing light of any selected color (wavelength), and a photometer for measuring the intensity of light. The instruments are arranged so that liquid in a cuvette can be placed between the spectrometer beam and the photometer. The amount of light passing through the tube is measured by the photometer. The photometer delivers a voltage signal to a display device, normally a galvanometer. The signal changes as the amount of light absorbed by the liquid changes.
If development of color is linked to the concentration of a substance in solution then that concentration can be measured by determining the extent of absorption of light at the appropriate wavelength. For example hemoglobin appears red because the hemoglobin absorbs blue and green light rays much more effectively than red. The degree of absorbance of blue or green light is proportional to the concentration of hemoglobin.
When monochromatic light (light of a specific wavelength) passes through a solution there is usually a quantitative relationship (Beer's law) between the solute concentration and the intensity of the transmitted light, that is,

where I sub 0 is the intensity of transmitted light using the pure solvent, I is the intensity of the transmitted light when the colored compound is added, c is concentration of the colored compound, l is the distance the light passes through the solution, and k is a constant. If the light path l is a constant, as is the case with a spectrophotometer, Beer's law may be written,

where k is a new constant and T is the transmittance of the solution. There is a logarithmic relationship between transmittance and the concentration of the colored compound. Thus,

The O.D. is directly proportional to the concentration of the colored compound. Most spectrophotometers have a scale that reads both in O.D. (absorbance) units, which is a logarithmic scale, and in % transmittance, which is an arithmetic scale. As suggested by the above relationships, the absorbance scale is the most useful for colorimetric assays.
Using a Spectronic 20 spectrophotometer


The Spectronic 20 spectrometer is widely used in teaching laboratories. The specific instructions will differ with other models, but the principles remain.

  1. The instrument must have been warm for at least 15 min. prior to use. The power switch doubles as the zeroing control.
  2. Use the wavelength knob to set the desired wavelength. Extreme wavelengths, in the ultraviolet or infrared ranges, require special filters, light sources, and/or sample holders (cuvettes).
  3. With the sample cover closed, use the zero control to adjust the meter needle to "0" on the % transmittance scale (with no sample in the instrument the light path is blocked, so the photometer reads no light at all).
  4. Wipe the tube containing the reference solution with a lab wipe and place it into the sample holder. Close the cover and use the light control knob to set the meter needle to "0" on the absorbance scale.
  5. Remove the reference tube, wipe off the first sample or standard tube, insert it and close the cover. Read and record the absorbance, not the transmittance.
  6. Remove the sample tube, readjust the zero, and recalibrate if necessary before checking the next sample.
Why use a reference solution? Can't you just use a water blank? A proper reference solution contains color reagent plus sample buffer. The difference between the reference and a sample is that the concentration of the assayable substance in the reference solution is zero. The reference tube transmits as much light as is possible with the assay solution you are using. A sample tube with any concentration of the assayable substance absorbs more light than the reference, transmitting less light to the photometer. In order to obtain the best readability and accuracy, the scale is set to read zero absorbance (100% transmission) with the reference in place. Now you can use the full scale of the spectrophotometer. If you use a water blank as a reference, you might find that the assay solution alone absorbs so much light relative to distilled water that the usable scale is compressed, and the accuracy is very poor.



Protein Assays


Below is a list of assays for the determination of protein concentration in a solution. This list includes the sensitivity range, volume/amount of sample needed, subjective comments on accuracy and convenience, and major interfering agents. Procedural details, equipment requirements, and references are outlined in the individual assay documents. The criteria for choice of a protein assay are usually based on convenience, availability of protein for assay, presence or absence of interfering agents, and need for accuracy. For example, the Lowry method is very sensitive but is a two step procedure that requires a minimum of 40 minutes incubation time. The Bradford assay is more sensitive and can be read within 5 minutes, however proteins with low arginine content will be underestimated. Generally, estimates are more accurate for complex mixtures of proteins. Estimates of concentration of pure proteins can be very inaccurate depending on the principle of the assay, unless the same pure protein is used as a standard. Criteria will be discussed in the individual documents.

Because different proteins have different amino acid compositions, the sensitivity of colorimetric assays to individual proteins may vary widely. The most reprodicible results are obtained with standards composed of a mixture of proteins that is as similar as possible to the unknown. For most purposes, a relative amount is good enough, but the standard used should be reported. For example, the Bradford assay is much more sensitive to bovine serum albumin (BSA) than to immunoglobulin G (IgG), so that with IgG the investigator is likely to overestimate the amount of protein in a sample. With BSA the investigator is likely to underestimate the amount.
General Reference: Stoscheck, CM. Quantitation of Protein. Methods in Enzymology 182: 50-69 (1990).
Absorbance assays


  • Absorbance at 280 nm
    • Range: 20 micrograms to 3 mg
    • Volume: Depends on cuvette - volumes range from 200 microliters to 3 ml or greater
    • Accuracy: Fair
    • Convenience: Excellent, if equipment available
    • Major interfering agents: Detergents, nucleic acids, particulates, lipid droplets
  • Absorbance at 205 nm
    • Range: Roughly 1 to 100 micrograms
    • Volume: Depends on cuvette - volumes range from 200 microliters to 3 ml or greater
    • Accuracy: Fair
    • Convenience: Very good
    • Major interfering agents: Detergents, nucleic acids, particulates, lipid droplets
  • Extinction Coefficient
    • Range: 20 micrograms to 3 mg
    • Volume: Depends on cuvette - volumes range from 200 microliters to 3 ml or greater
    • Accuracy: ~2% (very good)
    • Convenience: Very good
    • Major interfering agents: Detergents, nucleic acids, particulates, lipid droplets
Colorimetric assays

  • Modified Lowry
    • Range: 2 to 100 micrograms
    • Volume: 1 ml (scale up for larger cuvettes)
    • Accuracy: Good
    • Convenience: Fair
    • Major interfering agents: Strong acids, ammonium sulfate
  • Biuret
    • Range: 1 to 10 mg
    • Volume: 5 ml (scale down for smaller cuvettes)
    • Accuracy: Good
    • Convenience: Good
    • Major interfering agents: Ammonium salts
  • Bradford assay
    • Range: 1 to 20 micrograms (micro assay); 20 to 200micrograms (macro assay)
    • Volume: 1 ml (micro); 5.5 ml (macro)
    • Accuracy: Good
    • Convenience: Excellent
    • Major interfering agents: None
  • Bicinchoninic Acid (Smith)
    • Range: 0.2 to 50 micrograms
    • Volume: 1 ml (scale up for larger cuvettes)
    • Accuracy: Good
    • Convenience: Good
    • Major interfering agents: Strong acids, ammonium sulfate, lipids
  • Amido Black method
    • Range: 2 to 24 micrograms
    • Volume: 2 ml
    • Accuracy: Good
    • Convenience: Poor
  • Colloidal Gold
    • Range: 20 to 640 nanograms
    • Volume: 1 ml (scale up for larger cuvettes)
    • Accuracy: Fair
    • Convenience: Poor

منقول من موقع علمي


[/align]



من مواضيع ابا عبدالله في المنتدى


التعديل الأخير تم بواسطة ابا عبدالله ; 05-29-2010 الساعة 10:18 PM
التوقيع

[align=center][align=justify]

ارحل بنفسك من أرض تضام بها ... ولا تكن من فراق الأهل في حرق

فالعنبر الخام روث في موطنــه ... وفي التغرب محمول على العنـق

والكحل نوع من الأحجار تنظـره ... في أرضه وهو مرمى على الطرق

لما تغرب حاز الفضل اجمعه ... فصار يحمل بين الجفن والحـدق

[/align][/align]
   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 05-29-2010, 08:50 PM   #8
ابا عبدالله
بيوكيميائي برونزي
 
الصورة الرمزية ابا عبدالله

 









ابا عبدالله غير متواجد حالياً
افتراضي

[align=center]نصيحة للاخ الذي كان يسال عن طريقة استخدام وتشغيل الجهاز هناك موقع في الانترنت youtube تكتب فيه اسم الجهاز وسوف ترى ان هناك من يشرح طريقة تشغيل الجهاز واستخدامه ان شاء الله والله يوفقك في حياتك العلمية والعملية والسلام عليكم ورحمة الله وبركاته
[/align]



من مواضيع ابا عبدالله في المنتدى

   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 05-29-2010, 09:45 PM   #10
سونهام يغمور
Bioc سابقاً
 
الصورة الرمزية سونهام يغمور

 









سونهام يغمور غير متواجد حالياً
افتراضي

برافوووو

الفيديو جدا كافي



من مواضيع سونهام يغمور في المنتدى

   
رد مع اقتباس
 
 
إضافة رد


الذين يشاهدون محتوى الموضوع الآن : 1 ( الأعضاء 0 والزوار 1)
 
أدوات الموضوع
انواع عرض الموضوع

تعليمات المشاركة
لا تستطيع إضافة مواضيع جديدة
لا تستطيع الرد على المواضيع
لا تستطيع إرفاق ملفات
لا تستطيع تعديل مشاركاتك

BB code is متاحة
كود [IMG] متاحة
كود HTML معطلة

الانتقال السريع

المواضيع المتشابهه
الموضوع كاتب الموضوع المنتدى مشاركات آخر مشاركة
طريقة اجراء تحليل البراز بالتفصيل فارس البادية تقنيات المعمل - Lab's techniques 13 10-11-2009 08:47 PM
ماهي اغلى دمعه بالكون ؟ نورا القـسم العام 0 08-24-2008 06:00 PM
هل الانسان مسؤول عن طريقة معاملة الناس له؟ روووح قسـم النقاش الجاد 17 07-04-2008 02:20 AM
ابغى طريقة تحديد الوليسترول في الدم او السيرم angel face قسم الاسئله و الاستفسارات - Questions 1 05-10-2008 01:41 AM
اسئلة واجوبه؟ احمد الاخصائي الاحـياء الدقيـقة - Microbiology 8 02-26-2008 03:40 PM



الساعة الآن 05:05 PM


Powered by vBulletin® Version 3.8.7
Copyright ©2000 - 2018, vBulletin Solutions, Inc.
يوتك