الرئيسية التحكم التسجيل
 

 
 
العودة   منتديات الكيمياء الحيوية للجميع > الكيمياء الحيوية الجنائية > استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية
 
 

إضافة رد
 
 
 
أدوات الموضوع انواع عرض الموضوع
 
 
 
 
قديم 04-08-2008, 07:13 PM   #1
الاميرال ستالين
ضيف

 






Messenger طريقة الاستخلاص بمادة Chelex

اصبحت هذه الطريقة الغير عضوية شائعة الاستخدام في كافة المختبرات الجنائية حول العالم وهي عبارة عن اضافة مادة غروية متمخلبة الى العينة مباشرة مثل الدم الطازج والبقع المنوية والدموية .




وقدمت مختبرات Biorad الامريكية هذه الطريقة في عام 1991م الى مجتمع الحمض النووي الوراثي الجنائي حيث ظهرت مادة Chelex لاول مرة ، وهي مادة غروية تسمح بتبادل الايونات وتتكون من بوليمرات الستيرين داي فينيل بنزين التي تحتوي على زوج من ايونات الايمينو ثنائية الاسيتات Iminodiacetate والتي تعمل كمجموعة مخلبية ترتبط بالايونات المعدنية مثل ايونات المغنيسيوم ، عند ازالة المغنيسيوم من تفاعل تصبح الانزيمات المحللة (Nuclease) غير نشطة وبالتالي يبقى جزيء الحمض النووي الوراثي سليما .





معظم الطرق التي تستخدم Chelex لاضافته على العينات الحيوية مثل بقع الدم الجافة وتغلى العينة لعدة دقائق بهدف تحطيم الخلايا واطلاق الحمض النووي الوراثي ، تسبق هذه العملية عادة غسل للعينة عدة مرات لازالة المواد الملوثة والمثبطة مثل مادة الهيموجلوبين وبروتينات اخرى .





تعريض الحمض النووي الوراثي لدرجة حرارة تقارب الغليان يؤدي الى فصل (تشويه) شريطي الحمض النووي الوراثي ويفجر جدار الخلية ويدمر بروتينات الخلية ، ثم تجرى عملية طرد مركزي لسحب هذه المادة الغروية الى القاع ويفصل الرائق المحتوي على الحمض النووي الوراثي في انبوب آخر لتكبيره مباشرة عن طريق تفاعل PCR.



اضافة كمية كبيرة من الدم الطازج او قص قطع كبيرة من بقع الدم الجاف تؤدي الى تثبيط تفاعل PCR ، لان صانعوا كواشف التكبير AmpF1STR يوصون بأخذ ثلاثة ميكروليتر من الدم الطازج وبقص مساحة 3*3 ميليمتر من بقع الدم الجاف للحصول على افضل النتائج .


على الرغم من ان هذه الطريقة غير مجدية لاستخدامها ضمن تقنية PCR التي لم تعد تستخدم على نطاق واسع في المجال الجنائي لانها تفصل (تشوه) شريطي الحمض النووي الوراثي الا انها تعتبر طريقة فعالة وسريعة للغاية اضافة الى انها تخلص التفاعل من المثبطات وتقلل خطر تعرض العينات للتلوث لان كامل العملية تتم في انبوب واحد .



تحياتي
ستالين



من مواضيع الاميرال ستالين في المنتدى

   
رد مع اقتباس
 
 
إضافة رد


الذين يشاهدون محتوى الموضوع الآن : 1 ( الأعضاء 0 والزوار 1)
 
أدوات الموضوع
انواع عرض الموضوع

تعليمات المشاركة
لا تستطيع إضافة مواضيع جديدة
لا تستطيع الرد على المواضيع
لا تستطيع إرفاق ملفات
لا تستطيع تعديل مشاركاتك

BB code is متاحة
كود [IMG] متاحة
كود HTML معطلة

الانتقال السريع

المواضيع المتشابهه
الموضوع كاتب الموضوع المنتدى مشاركات آخر مشاركة
طريقة الفينول كلوروفورم (الاستخلاص العضوي) الاميرال ستالين استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية 2 07-11-2011 01:29 AM
طريقة اجراء تحليل البراز بالتفصيل فارس البادية تقنيات المعمل - Lab's techniques 13 10-11-2009 08:47 PM
هل الانسان مسؤول عن طريقة معاملة الناس له؟ روووح قسـم النقاش الجاد 17 07-04-2008 02:20 AM
الاستخلاص التفاضلي الاميرال ستالين استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية 0 04-08-2008 07:18 PM
طريقة الاستخلاص بواسطة بطاقات Fta الاميرال ستالين استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية 0 04-08-2008 07:16 PM



الساعة الآن 01:22 AM


Powered by vBulletin® Version 3.8.7
Copyright ©2000 - 2018, vBulletin Solutions, Inc.
يوتك