الرئيسية التحكم التسجيل
 

 
 
العودة   منتديات الكيمياء الحيوية للجميع > الكيمياء الحيوية الجنائية > استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية
 
 

إضافة رد
 
 
 
أدوات الموضوع انواع عرض الموضوع
 
 
 
 
قديم 07-24-2008, 09:13 PM   #1
IMAD RABEE3
بيوكيميائي جديد

 









IMAD RABEE3 غير متواجد حالياً
افتراضي تقنية تفاعل البوليميرازالتسلسلي pcr

من اهم الاسباب التي كانت تعيق تطبيق تقنيات البيولوجيا الجزيئية في مختبرات
التشخيص الطبية الروتينية هو ندرة الحموض النووية في العينة المدروسة
لكن بفضل اكتشاف تقنيةPCR على يد الباحث K.Mullis عام 1985 تمكن الباحثون من
الحصول على كميات ضخمة من الحموض النووية
وتعتبر هذه التقنية سهلة وبسيطة من حيث المبدأ حيث يتم استخدام قطعة واحدة
من ال DNA ( مورثة واحدة مثلاً ) ويتم اكثارها لانتاج ملايين أو بلايين النسخ
وتختلف هذه التقنية اختلافاً كلياً عن تقنية تنسيل الجينات لأن تقنية تنسيل الجينات
تعتمد على خلايا حية من أجل تضخيم المورثات أما في تقنية ال PCR يتم التضخيم في انبوب الاختبار وعلى قطع معزولة من ال DNA
هذا وتعتمد تقنية ال PCR على نفس المعلومات النظرية المعروفة والخاصة بتضاعف
الـ DNA وبالتالي أصبح بمقدورنا تضخيم ( إكثار ) أي مورثة أو قطعة من ال DNA مخبرياً
في حال توصلنا إلى فصل خيطي ال DNA و كذلك إذا كانت لدينا معلومات مسبقة عن عن التسلسل النيكلوتيدي لل DNA المراد تضخيمه . لنتمكن من تصنيع البادئة Primer الخاصة بكل خيط من خيوط ال DNA المراد تضخيمه
ازداد تطور ال PCR بفضل اكتشاف وعزل نوع خاص من الجراثيم تعيش في نبع للمياه
الحارة في محمية يللوستون القومية في الولايات المتحدة
حيث تملك هذه الجرثومة والتي أطلق عليها اسم Thermus aquatics مقدرة هائلة على تحمل حرارة مرتفعة تصل حتى 86 درجة مئوية
ولكن كيف استفاد الباحث K.Mullis من هذا الاكتشاف في تطوير تقنية PCR ؟
في الحقيقة لقد استخدمت تقنيات التضخيم السابقة انزيم البلمرة DNA Polymerase
المعروف والمستخلص من جراثيم E. coli
لكن ابرز سلبيات استخدام هذا الانزيم أنه كان من الضروري إضافة كميات كبيرة منه
بعد كل دورة تضخيم للـ DNA ( أو بعد كل دورة حرارية ) وذلك بسبب التلف الذي تسببه الحرارة المرتفعة - والضرورية لفصل خيطي الـ DNA عن بعضهما – لانزيم DNA Polymerase لتفادي هذه المشكلة قام موليس بعزل انزيم البلمرة الخاص بالجرثومة المذكورةThermus aquatics و أطلق عليه اسم انزيم Taq Polymerase .
يتصف هذا الانزيم بكونه ثابت حرارياً وقادر على مقاومة الحرارة المرتفعة
وهكذا يتم إضافة انزيم ال Taq Polymerase مرة واحدة فقط قبل البدء بعملية التضخيم .
وسوف نتطرق لمراحل تفاعل الPCR والتطبيقات العملية لهذه التقنية إن احببتم

لكم تحياتي



من مواضيع IMAD RABEE3 في المنتدى


التعديل الأخير تم بواسطة IMAD RABEE3 ; 07-24-2008 الساعة 09:28 PM
   
رد مع اقتباس
 
 
 
 
قديم 07-11-2011, 01:33 AM   #3
Glutathione
بيوكيميائي جديد

 









Glutathione غير متواجد حالياً
افتراضي

تقنيه هامه جدا ولا يكاد يخلو معمل من وجود جهاز ال thermal cycler
و توجد عدة أنواع لل PCR و كلها تعتمد على الهدف أو على ظروف العينه و من الامثله :
qRT-PCR
Nested-PCR
TAIL-PCR
Long-PCR
high fidelity PCR
multiplex PCR
RACE-PCR

و القائمه تطول


وشكرا على الموضوع




   
رد مع اقتباس
 
 
إضافة رد


الذين يشاهدون محتوى الموضوع الآن : 1 ( الأعضاء 0 والزوار 1)
 
أدوات الموضوع
انواع عرض الموضوع

تعليمات المشاركة
لا تستطيع إضافة مواضيع جديدة
لا تستطيع الرد على المواضيع
لا تستطيع إرفاق ملفات
لا تستطيع تعديل مشاركاتك

BB code is متاحة
كود [IMG] متاحة
كود HTML معطلة

الانتقال السريع

المواضيع المتشابهه
الموضوع كاتب الموضوع المنتدى مشاركات آخر مشاركة
مركز تقنية المعلومات و الحاسب الآلي مسلم المصرى قسم الحاسب الالى و البرامج 0 06-23-2012 11:58 PM
وظائف أكاديمية شاغرة بجامعة الملك عبد العزيز 28/1429 ولد المدينه وظائف القطاع العام 7 09-16-2009 12:42 PM
تفاعل البوليميريز المتسلسل (pcr) عصام513 اظهار الانماط الوراثية 1 04-21-2009 08:30 PM
تفاعل ناشر (طارد ) للحراره ملاك قمر الكيمياء الفيزيائية 2 01-20-2008 04:12 PM
تفاعل عضوى دلوعة الكيمياء العضوية 12 12-15-2007 03:56 AM



الساعة الآن 05:06 AM


Powered by vBulletin® Version 3.8.7
Copyright ©2000 - 2018, vBulletin Solutions, Inc.
يوتك