التقنيه هذي تستخدم بشكل رئيسي لقياس معدل التعبير الجيني gene expression و يستخدم لها نوع خاص أنزيمات polymerase و هو عباره عن خليط من الانزيم مع dNTPs و مع صبغه خاصه ترتبط بال minor grove و تعطي اشاره يتم التقاطها عن طريق كميرا موجوده بالجهاز و مستوى التعبير الجييني يتم قياسه من شدة الاشاره الضوئيه التي تصدرها الصبغه .. و من أشهر الصبغات المستعمله sybrgreen و Sso EvaGreen