عرض مشاركة واحدة
 
 
قديم 04-09-2008, 06:03 PM   #1
الاميرال ستالين
ضيف

 






Messenger تكبير عدة مورثات في وقت واحد Multiplex PCR

تفاعل PCR له القدرة على نسخ (تكبير) اكثر من منطقة في الحمض النووي الوراثي في وقت واحد وذلك باضافة العديد من ازواج البادئات الى خليط التفاعل كل زوج منها مخصص اتكبير مورث واحد فقط .


تكبير مورثين (منطقتين) او اكثر يطلق عليه مصطلح Multiplex PCR ، وحتى يتم تكبير اكثر من موروث بشكل صحيح لابد ان تكون ازواج من البادئات متوافقة مع بعضها البعض بمعنى ان تكون حرارة التصاق البادئات متشابهة وان لاتتفاعل مع بعضها البعض لتفادي حدوث ظاهرة البادئة المزدوجة Dimer Primer والتي ترتبط فيها البادئات مع بعضهل البعض بدلا من ارتباطها بالحمض النووي الوراثي ، كلما اضيف زوج جديد من البادئات الى خليط التفاعل زاد احنمال تفاعل هذه البادئات مع بعضها البعض بشكل معقد .




كل تطبيق جديد لتفاعلPCR يحتاج الى درجة عالية من الدقة ترقى بكل من عناصر التفاعل وظروف عملية التدوير الحراري الى مستوى مثالي وهو مايمثل تحديا صعبا لتحقيق التوازن بين نواتج التفاعل لكافة المورثات المكبرة .


من اهم المتغيرات التي يتم فحصها لمحاولة الحصول على افضل النتائج هي دراسة تسلسل تلك البادئات وتركيزها مقارنة مع تركيز ايونات المغنيسيوم والتي لها اكبر الاثر في نجاح او فشل هذه العملية .


وقت الاستطالة خلال عملية التدوير الحراري تستغرق وقتا اطول عند تكبير عدة مورثات في وقت واحد حتى تتاح الفرصة لانزيم البوليمريز لنسخ كل المناطق الوراثية المطلوبة .



تحياتي
ستالين



من مواضيع الاميرال ستالين في المنتدى

   
رد مع اقتباس