منتديات الكيمياء الحيوية للجميع

منتديات الكيمياء الحيوية للجميع (http://www.biochemistry4all.com/forums/index.php)
-   اظهار الانماط الوراثية (http://www.biochemistry4all.com/forums/forumdisplay.php?f=72)
-   -   الخصائص المطلوبة في كواشف Str الجنائية (http://www.biochemistry4all.com/forums/showthread.php?t=11088)

الاميرال ستالين 04-09-2008 09:03 PM

الخصائص المطلوبة في كواشف Str الجنائية
 

في اختبارات تحديد هوية الاشخاص من المهم جدا وجود كواشف لها اقصى درجة من الاختلافات او دمج عدة كواشف تمكننا من التمييز بن العينات , اليلات الوحدات التكرارية القصيرة STR تبلغ احجامها 100 – 400 قاعدة نيتروجينية مقارنة باحجام الوحدات التكرارية متوسطة الطول VNTR)) Minisatellite والتي تبلغ احجام اليلاتها 400 – 1000 قاعدة نيتروجينية مما يجعل اليلات الوحدات التكرارية القصيرة STR اكثر ملائمة للاستخدام في التطبيقات الجنائية حيث ان المختبرات الجنائية تواجه صعوبة كبيرة في تكبير العينات الجنائية شديدة التحلل , اضافة الى العينات المختلطة المرفوعة في جرائم الاعتداء الجنسي .



يتم تكبير العينات المتحللة بشكل جيد عندما تكون الاليلات صغيرة الحجم (STR) , بينما نلاحظ سقوط الاليلات من عملية التكبير في الاليلات كبيرة الحجم (Minisatellite) , بسبب التكبير التفضيلي للاليلات الصغيرة والذي يعتبر مشكلة تعيق تكبير بعض تلك الوحدات متوسطة الطول , علاوة على ذلك .. يتم فصل القواعد النيتروجينية بشكل افضل ف قطع الحمض النووي الوراثي التي تكون احجامها اقل من 500 قاعدة نيتروجينية عن طريق عملية الفصل الكهربائي (Polyacrylamide Gel Electrophoresis) , لهذه الاسباب البيولوجية والتقنية تعتبر كواشف STR اكثر ملائمة للاستخدام في التطبيقات الجنائية اكثر من كواشف VNTR)) Minisatellite .



من بين الانواع المختلفة لانظمة كواشف STR تعتبر التكرارات الرباعية النيوكليتيد اكثر شيوعا من الثنائية او الثلاثية النيوكليتيد , وتعتبر الخماسية والسداسية اقل استخداما على الرغم من استخدام بعض المختبرات لها .


توجد ظاهرة بيولوجية تسمى Stutter تنشأ عن تكبير اليلات الوحدات التكرارية القصيرة STR وهي عبارة عن نواتج تكبير تنقص بمقدار وحدة تكرارية عن حجم الاليل الحقيقي , وبناءا على المنطقة الوراثية المكبرة تصل نسبة حدوث هذه الظاهرة في بعض الاحيان الى 15 % من حجم الاليل في الوحدات رباعية النيوكليتيد , وترتفع هذه النسبة في النيوكليتيدات الثنائية والثلاثية لتصل الى 30 % او اكثر مما يجعل عملية تحليل النتائج في العينات المختلطة امرا بالغ الصعوبة .


كما ان وجود وحدات رباعية النيوكليتيد يجعل عملية فصل الاليلات الغيرمتجانسة القريبة من بعضها البعض امرا سهلا بواسطة عملية الفصل الكهربائي , بينما لاتتم عملية الفصل هذه بشكل جيد في وجود اليلات تبتعد عن بعضها مسافة تقدر بقاعدتين او ثلاث قواعد كما هو الحال في النيوكليتيدات الثنائية او الثلاثية .


وتتلخص اهم الاسباب التي تجعل وحدات التكرار الرباعية مثالية لاستخدامها ككواشف لمورثات STR على النحو التالي :



• ضيق نطاق حجم الاليلات مما يسمح بتكبير اكثرمن مورث دفعة واحدة .
• ضيق نطاق حجم الاليلات الامر الذي يحد من عملية سقوط الاليلات بسبب التكبير التفضيلي للاليلات الصغيرة .
• امكانية الحصول على نواتج صغيرة الحجم لعملية التكبير مما يسمح باظهار الانماط الوراثية للعينات المتحللة .
• انخفاض معدل حدوث ظاهرة Sutter , الامر الذي يساعد في عملية تحليل نتائج العينات المختلطة .

خلال العقد الماضي , تم اكتشاف عدد كبير من كواشف STR رباعية النيوكليتيد لاستخدامها في التطبيقات الجنائية مثل كتشف Y-Chromosome الذي يستخدم لفصل المورثات الذكرية عن المورثات الانثوية في جرائم الاعتداء الجنسي .
الكواشف المستخدمة في التطبيقات الجنائية لابد ان تتوافر فيها الخصائص التالية :
• لها قوة تمييز عالية 90% مع ملاحظة ان تكون قوة التمييز للاليلات الغير متجانسة اكبر من 70% .
• ان تختار من مواقع متفرقة من الكروموسومات للتاكد من ان المناطق الوراثية المرتبطة مع بعضها لم يتم اختيارها .
• الحصول على نتائج ثابتة وقوية عندما يتم تكبيرها مع مورثات اخرى .
• لها اقل المعدلات في حدوث الطفرات .
• ان تكون اطوال الاليلات الناتجة (المتوقعة) ضمن النطاق 90 – 500 قاعدة نيتروجينية , حتى تكون ملائمة لفحص العينات المتحللة .


ونجد ان الكواشف المستخدمة حاليا في المجال الجنائي تم اختيارها من كروموسومات منفصلة لتفادي المشاكل الناجمة عن ارتباط الكواشف ببعضها البعض .




تحياتي
ستالين


الساعة الآن 12:30 PM

Powered by vBulletin® Version 3.8.7
Copyright ©2000 - 2022, vBulletin Solutions, Inc.