منتديات الكيمياء الحيوية للجميع

منتديات الكيمياء الحيوية للجميع (http://www.biochemistry4all.com/forums/index.php)
-   استخلاص وتكبير وقياس العينات الوراثية (http://www.biochemistry4all.com/forums/forumdisplay.php?f=69)
-   -   طريقة الاستخلاص بواسطة بطاقات Fta (http://www.biochemistry4all.com/forums/showthread.php?t=11007)

الاميرال ستالين 04-08-2008 07:16 PM

طريقة الاستخلاص بواسطة بطاقات Fta
 

ظهر الجيل الجديد من طرق الاستخلاص باستخدام مايعرف ببطاقات FTA والتي بدات في اواخر الثمانينات الميلادية بواسطة (Lee Burgyne) في جامعة فلندرز في استراليا كطريقة لحفظ عينات الحمض النووي الوراثي .


هذه البطاقات عبارة عن ورق ممتص مصنوع من السليلوز يحتوي على اربع مواد كيميائية تقوم بحماية الحمض النووي الوراثي من عملية التحلل الوراثي بواسطة انزيمات (Neucleases) وتحفظ البطاقة بعيدا عن النمو البكتيري وبالتالي فان الحمض النووي الوراثي في هذه البطاقات ثابت ويمكن حفظه لعدة سنوات في درجة حرارة الغرفة .


استخدام هذه البطاقات يتضمن اضافة نقطة من الدم وتركها كي تجف ، تتحلل الخلايا عند ملامستها لهذه البطاقة ويصبح الحمض النووي الوراثي الناتج من كريات الدم البيضاء على شبكة داخل تلك البطاقات .


تثقب هذه البطاقة ثقبا صغيرا وتوضع هذه القطعة الصغيرة في انبوب حيث يتم تنقية الحمض النووي الوراثي بغسله عدة مرات بمذيب لازالة مادة الهيموجلوبين والمثبطات الاخرى ويمكن ملاحظة هذه العملية عند اختفاء اللون الاحمر من على تلك القطعة .


وعند اتمام عملية الغسل هذه يفصل الرائق ذو اللون الاحمر المحتوي على هذه المثبطات بعملية طرد مركزي ومن ثم تضاف تلك القطعة النظيفة مباشرة الى تفاعل PCR.


بعض المختبرات تقوم باستخلاص هذه البطاقات بواسطة مادة Chelex ومن ثم اخذ الرائق المحتوي على الحمض النووي الوراثي واضافته مباشرة الى PCR.


نقاط الدم يمكن استخدام فرشاة اسنان تستخدم لمرة واحدة فقط تبلل بالماء ويحك التجويف الداخلي للفم مرتين او ثلاث مرات ومن ثم توضع هذه الفرشاة على البطاقة وينقر عليها حتى تسقط هذه القطرات على البطاقة ومن ثم يتم حفظ عينات الخلايا الطلائية للاطفال الذين لايرغبون في اعطاء عينات من دمائهم خوفا من وخز اصابعهم بالابر .



استخدام هذه البطاقات يجعل من السهل القيام بعمية التكبير بدون الحاجة الى قياس كمية الحمض النووي الوراثي المستخلص مما يؤدي الى ظهور ثورة في مجال الفحص الالي الذي يستخدم اجهزة آلية عن طريق الحاسب الالي لفحص الحمض النووي الوراثي الامر الذي يساعد على بناء قواعد المعلومات الوراثية بصورة اسرع .


تحياتي
ستالين


الساعة الآن 03:14 AM

Powered by vBulletin® Version 3.8.7
Copyright ©2000 - 2021, vBulletin Solutions, Inc.