snow white
08-01-2008, 04:16 PM
بســـــــــــــــــم الله الرحمـــــــــــن الرحيـــــــــــــــــــــــم
تختلف طريقة التقدير مابين الاغذية فلكل غذاء مايكروب معين كما تختلف الاغذية في محتواها العددي من الاحياء المجهرية وهذا الاختلاف يكون جوهريا اما اهم طرق العد فهي
1-_ طريقة العد بالاطباق plate count
وهي طريقة بسيطة يقاس فيها البكتريا الحية فقط ويكون العد فيها تقريبي
فوائد هذه الطريقة هي 1_ لمعرفة نسبة التلوث الموجودة في الغذاء
2_ معرفة مصدر التلوث
3_ تفيد في تحديد دقة المعاملاتتتم طريقة العد بالاطباق بطريقتين:
أ_ الصب بالاطباقpour plate
تتم بصب 1مل من التخفيف الملائم للغذاء ثم يصب الوسط الزرعي وتحضن الاطباق وبعد انتهاء مدة الحضن تعد الاطباق التي تتراوح فيها من 30_300 مستعمرة
ب_ النشر السطحي surface or spread plating
تستخدم في بعض الدراسات مثل عد بكتريا العنقوديات الذهبية على الوسط الزرعي المتصلب mannitol salt agar حيث يحضر مسبقا ويجفف سطحه جيدا ثم ينقل مقدار(0.1) من التخفيف الغذائي ثم ينشر على السطح بواسطة قضيب زجاجي ملتوي معقم يشبه حرف L
2-_ طريقة العد الاكثر احتمالا most propal number (m.p.n
3-العد المجهري المباشر Direct microscopic count
تستخدم هذه الطريقة للاغذية السائلة خاصة الحليب وهي تعد البكتريا الحية والميتة كما انها تعد دقائق الغذاء على انها بكتريا لذلك بعض الهيئات الصحية لاتعمل هذا الفحص وتشمل هذا طريقتين
أ_ طريقة شريحة العد counting chamber
تستخدم في هذه الطريقة السلايد المسمى petroff _hausser slide وهي عبارة عن شريحة مقسمة الى مربعات صغيرة يتم حساب البكتريا فيها بعد اخذ حجم معلوم من التخفيف المناسب للعينة وحساب البكتيا حسب المعادلة :
عدد البكتريا في 1مل = معدل عدد البكتريا في المربع الواحد *معامل شريحة العد * مقلوب التخفيف
ب_ طريقة بريد Breed method
تتم بنشر مامقداره (0.01) مل من السائل المراد عد البكتريا فيه على شريحة زجاجية ننشر نشر متجانس على مساحة 1سنتمتر مربع ثم يثبت بالحرارة ويصبغ باحد الصبغات البسيطة ثم يفحص تحت المجهر ويحسب عدد البكتريا حسب المعادلة :
العدد الكلي للبكتريا في 1مل = معدل عدد الخلايا في كل حقل *عدد الحقول في 1سنتمتر مربع *100
4 - الترشيح بالاغشية Membrane filteratioترشح الاغذية خاصة العصائر ومحاليل الاغذية السائلة من خلال مرشحات خاصة ثم يزرع المرشح على وسط ملائم لنمو البكتريا المراد عدها ويحضن في الظروف الملائمة للنمو ثم يحسب عدد المستعمرات النامية على السطح
تختلف طريقة التقدير مابين الاغذية فلكل غذاء مايكروب معين كما تختلف الاغذية في محتواها العددي من الاحياء المجهرية وهذا الاختلاف يكون جوهريا اما اهم طرق العد فهي
1-_ طريقة العد بالاطباق plate count
وهي طريقة بسيطة يقاس فيها البكتريا الحية فقط ويكون العد فيها تقريبي
فوائد هذه الطريقة هي 1_ لمعرفة نسبة التلوث الموجودة في الغذاء
2_ معرفة مصدر التلوث
3_ تفيد في تحديد دقة المعاملاتتتم طريقة العد بالاطباق بطريقتين:
أ_ الصب بالاطباقpour plate
تتم بصب 1مل من التخفيف الملائم للغذاء ثم يصب الوسط الزرعي وتحضن الاطباق وبعد انتهاء مدة الحضن تعد الاطباق التي تتراوح فيها من 30_300 مستعمرة
ب_ النشر السطحي surface or spread plating
تستخدم في بعض الدراسات مثل عد بكتريا العنقوديات الذهبية على الوسط الزرعي المتصلب mannitol salt agar حيث يحضر مسبقا ويجفف سطحه جيدا ثم ينقل مقدار(0.1) من التخفيف الغذائي ثم ينشر على السطح بواسطة قضيب زجاجي ملتوي معقم يشبه حرف L
2-_ طريقة العد الاكثر احتمالا most propal number (m.p.n
3-العد المجهري المباشر Direct microscopic count
تستخدم هذه الطريقة للاغذية السائلة خاصة الحليب وهي تعد البكتريا الحية والميتة كما انها تعد دقائق الغذاء على انها بكتريا لذلك بعض الهيئات الصحية لاتعمل هذا الفحص وتشمل هذا طريقتين
أ_ طريقة شريحة العد counting chamber
تستخدم في هذه الطريقة السلايد المسمى petroff _hausser slide وهي عبارة عن شريحة مقسمة الى مربعات صغيرة يتم حساب البكتريا فيها بعد اخذ حجم معلوم من التخفيف المناسب للعينة وحساب البكتيا حسب المعادلة :
عدد البكتريا في 1مل = معدل عدد البكتريا في المربع الواحد *معامل شريحة العد * مقلوب التخفيف
ب_ طريقة بريد Breed method
تتم بنشر مامقداره (0.01) مل من السائل المراد عد البكتريا فيه على شريحة زجاجية ننشر نشر متجانس على مساحة 1سنتمتر مربع ثم يثبت بالحرارة ويصبغ باحد الصبغات البسيطة ثم يفحص تحت المجهر ويحسب عدد البكتريا حسب المعادلة :
العدد الكلي للبكتريا في 1مل = معدل عدد الخلايا في كل حقل *عدد الحقول في 1سنتمتر مربع *100
4 - الترشيح بالاغشية Membrane filteratioترشح الاغذية خاصة العصائر ومحاليل الاغذية السائلة من خلال مرشحات خاصة ثم يزرع المرشح على وسط ملائم لنمو البكتريا المراد عدها ويحضن في الظروف الملائمة للنمو ثم يحسب عدد المستعمرات النامية على السطح